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Sigma-Aldrich P5147蛋白酶 来源于灰色链霉菌

Type XIV, ≥3.5 units/mg solid, powder

别名:

Actinase E, Pronase E

特异性

  一种具有包括细胞外丝氨酸蛋白酶在内至少叁种蛋白水解活性的混合物。通常，丝氨酸蛋白酶可显示出广泛的底物特异性，而这被视为通过分子中由一个Asp、一个His和Ser残基组成的活性位点所介导的。该酶更倾向于水解谷氨酸或天冬氨酸的羧基侧的肽键。

应用

  来自灰色链霉菌的蛋白酶已被用于：

• 消化髓核（NP）组织

• 催化不对称曼尼希一锅反应

• 淀粉脱蛋白[3]

• 消化细胞解离用脑切片

  来自Sigma的酶已用于抗凝血酶-肝素复合物的消化和分析。[5]它还用于分离抗酶淀粉。

  蛋白酶是一种通过水解肽键来分解蛋白的酶。 蛋白酶用于降解蛋白、研究蛋白酶抑制剂和研究热灭活动力学。 蛋白酶用于孵育中核酸的分离过程。 来自灰色链霉菌的蛋白酶已用于通过四肽醛和丝氨酸蛋白酶而形成的共价复合物的结晶学和动力学研究中[7]。

蛋白酶通常用于核酸的分离过程，通过补充0.2％十二烷基硫酸钠和10 mM EDTA并孵育0.5-3.0小时。

  该酶比已知碱性蛋白酶在更高的pH范围内更具活性，即使在0.2N NaOH溶液中也显示出了蛋白水解活性。该酶用于不溶性蛋白的蛋白水解和蛋白的结构研究。

生化/生理作用

  蛋白酶可通过肽键的水解使蛋白质分解代谢。 蛋白酶可被丝氨酸活性位点抑制剂所灭活，如苯甲（箩颈补）基磺酰氟（PMSF）和二异丙基氟磷酸盐。 来自灰色链霉菌的蛋白酶是一种具有包括细胞外丝氨酸蛋白酶在内至少叁种蛋白水解活性的混合物。丝氨酸蛋白酶显示出广泛的底物特异性，而这被视为通过分子中由一个Asp、一个His和Ser残基组成的活性位点所介导的。该酶更倾向于水解谷氨酸或天冬氨酸的羧基侧的肽键。

  该产物是由至少叁种酪蛋白水解活性和一种氨肽酶活性所组成的混合物。[8]该酪蛋白分解酶被命名为灰色链霉菌蛋白酶A、灰色链霉菌蛋白酶B和灰色链霉菌胰蛋白酶。当需要广泛或完（飞补苍）全降解蛋白质时，可使用该产物。该蛋白酶混合物是高度非特异性的并可作为单氨基酸消化酪蛋白至>70％的程度。

特点和优势

• 在pH 5.0中9.0范围内高度稳定，在pH 8.8具有最高活性

• 与多种DNA和RNA分离缓冲液兼容

• 广泛的底物特异性

质量

含有醋酸钙。

物理属性

  通过在80 °C以上加热15-20分钟以完（飞补苍）全灭活。

单位定义

  在pH 7.5，37 °C 条件下，一单位的酶每分钟将会水解酪蛋白以产生与1.0 μ摩尔 (181 μg) 酪氨酸等同的颜色（Folin-Ciocalteu试剂提供的颜色）。

制备说明

  收集自灰色链霉菌的培养基肉汤中。

Sigma-Aldrich P5147蛋白酶的订货信息：