a.使用窄径柱(3.0mm内径)
这部分内容将介绍如何减小柱外效应并提供如何在HPLC系统上使得窄径柱达到最好的性能。一般来讲3mm内径的窄柱不需要改变HPLC系统。然而，如果使用2.1mm内径的色谱柱则需要优化HPLC系统以消除过多的系统谱带扩展体积，过大的系统谱带扩展体积会造成峰展宽，分离效果差，灵敏度降低。
b.系统谱带扩展对2.1mm内径的色谱柱的影响
同样的色谱柱，在谱带扩展体积为70μL的系统上塔板数为10,000;而在谱带扩展体积为100μL的系统上塔板数为8,000。
提示:柱后分流器将引入额外的谱带扩展LC系统特别是有柱后分流器的系统优化对于灵敏度和分离度是至关重要的。优化的方法包括锥箍的深度适当，同时尽可能减小管路的内径和长度。图9是一个LC/MS/MS系统优化前后的差异，灵敏度和分离度都提高了一倍以上。
c.有关优化LC/MS/MS系统的建议
a)使用2.1mm内径色谱柱时，请使用微径检测器流动池(说明:为了减小谱带扩展体积而缩短流动池的长度会导致检测器灵敏度下降)。
b)尽可能减小进样器的loop环体积。
c)常规HPLC系统使用0.009英寸(0.25mm)的连接管路，使用2.1mm微径柱的系统需要使用0.005英寸(0.12mm)的管路。
d)注意不同厂家色谱柱的不同，保证管路和色谱柱连接恰当。
e)检测器时间常数应缩短为0.2秒以内。
d.沃特世小颗粒填料(2.5μm)色谱柱-快速液相色谱
沃特世公司2.5μm颗粒的色谱柱提供快速高效分离，并具有很好的柱寿命，以下内容列出了使用2.5μm小颗粒色谱柱需要考虑的几个因素:
注意:装填2.5μm小颗粒的色谱柱出口端的过滤片孔径比进口端小，因此不能将色谱柱进行反冲。
a)流速:同5μm颗粒的色谱柱相比，2.5μm颗粒的色谱柱具有更高的最佳流速，当需要高柱效和快速分离时需要选择这种色谱柱。当然，高流速势必会产生高的操作压力。
提示:请根据所用LC系统的实际情况调节流速
b)反压:对于同样规格的色谱柱，2.5μm颗粒的柱压比5μm颗粒要高很多。沃特世公司建议选择较短的色谱柱，这样还可以达到更快的分离。
c)温度:可以使用较高的温度来补偿小颗粒造成的压力升高，XTerra色谱柱的建议使用温度是
20-60℃。
d)采样速率:使用10点/秒以上的采样速率，为了得到最佳的重现性，则需要最早流出的峰至少具有20个数据点。
e)检测器时间常数:对于快速分析,使用0.1秒以下的时间常数。
