XTerra色谱柱的前处理和操作使用
为确保XTerra&迟谤补诲别;色谱柱具有最佳的性能，请遵守以下操作指导:
a.保护柱
在进样器和分析柱之间使用填料化学和颗粒大小都适合的保护柱对于保护分析柱至关重要。请选择高性能的保护柱以便在保护分析柱的同时不会影响到分离效果。
保护柱需要定期更换，更换的周期主要取决于样品的干净程度。当系统压力上升至超过某个设定值或者突然出现色谱峰分叉的现象，往往是需要更换保护柱的信号。
b.样品前处理
1. 样品中的杂质通常会污染色谱柱，建议采用合适的SPE技术(Oasis或Sep-pak)净化样品来避免这个问题。
2.用流动相或比流动相洗脱强度弱的溶液(含有较少有机溶剂)溶解或稀释样品可以获得最好的峰形和检测灵敏度。
3.果样品在流动相中不溶解或者溶解度很差时，要确保样品、样品溶液和流动相是互溶的，以避免样品在流动相中析出。
4. 用0.2μm的滤膜过滤样品以充分去除颗粒杂质，如果样品溶解在含有机溶剂的改性剂(如乙腈、甲醇)的溶剂中，在选择滤膜时要注意膜的材质不会在该溶剂中溶解，也可以在8000rpm转速的条件下离心20分钟后移取上清液进样。
c.pH使用范围
XTerra&迟谤补诲别;色谱柱的建议pH使用范围比硅胶基体色谱柱的宽，XTerraMS色谱柱的pH使用范围是1-12，XTerra RP色谱柱的pH使用范围是2-11。值得指出的是:色谱柱的寿命取决于所用缓冲液的种类、浓度和温度。
以下的表格2，3，4列出了建议使用的不同pH的缓冲溶液体系，可以作为开发LC方法的参考。请注意在高温条件下使用磷酸盐缓冲体系会对柱寿命有很大的影响，尽管XTerra色谱柱比硅胶基体色谱柱具有更长的寿命。
表2:XTerra&迟谤补诲别;色谱柱建议使用的缓冲溶液体系(pH1-7)
表3:XTerra&迟谤补诲别;色谱柱建议使用的缓冲溶液体系(pH 7-12)
表4:XTerra&迟谤补诲别;色谱柱建议使用的缓冲溶液体系(pH9-12)
d.溶剂
为了使色谱柱的性能达到最好，建议使用高品质的色谱溶剂。所有水相流动相在使用前都必须经过0.2μm滤膜过滤，建议使用Gelman Acrodisc过滤器。含有悬浮颗粒的溶剂通常会堵塞色谱柱入口滤片，这将导致柱压升高，分离度变差。
溶剂使用前需要充分脱气，这可以避免在泵和检测器内出现气泡，同时建议使用在线脱气装置，由于在运行低压梯度时水相和有机溶剂混合会产生气泡，因此充分脱气尤为重要。
e.压力
所有XTerra&迟谤补诲别;色谱柱能够耐受6000psi(400bar)的压力，为了获得更长的使用寿命，我们还是建议色谱柱尽可能在低于4000~5000psi压力下使用。
f.温度
XTerra&迟谤补诲别;色谱柱的建议使用温度是20-60℃，高温可以提高分离选择性、降低流动相粘度并同时提高传质速率。然而，超过室温使用色谱柱对柱寿命有都负面影响，其影响程度取决于流动相pH和所使用的缓冲体系。
g.等度分离方法的转移
请根据如下公式计算不同规格的色谱柱相应的体积流速(保持流动相的线速度不变)、上样量和上样体积:
如果色谱柱内径和长度改变:
F2=F1×(r2/r1)
上样量2=上样量1X(r2/r1)×(L2/L1)
上样体积2=上样体积1X(r2/r1)2×(L2/L1)
其中，r代表色谱柱内径
F代表体积流速
L代表柱长
1代表初始色谱柱
2代表目标色谱柱
