Spherisorb色谱柱的清洗、再生和存放
A. 清洗与再生
如果发生峰形改变、峰分叉、出现肩峰、保留时间改变、分离度变化或柱压升高，说明色谱柱可能已被污染。更换当前使用的保护柱通常可以恢复色谱柱的性能。如果色谱柱性能未恢复(或者您没有使用保护柱)，请遵循下文详述的程序操作。为防止潜在的污染影响检测器性能，建议清洗期间断开所有检测器与色谱柱洗脱液的连接。对任何清洗程序来说，反转通过色谱柱的液流方向(反冲)都可能提升清洗效率。
1、反相色谱柱
通常情况下，用纯有机溶剂进行冲洗(小心避免缓冲液出现沉淀)就足以去除大部分污染物。如果冲洗不能解决问题，可采用以下清洗和再生步骤冲洗色谱柱。请根据样品和/或您认为污染色谱柱的物质的性质，选择与之匹配的常规清洗方法(见表4)。用20倍柱体积(例如对于4.6 x 250 mm色谱柱，使用80 mL溶剂)HPLC级溶剂冲洗色谱柱。将流动相温度升至35-55℃可以提高清洗效率。如果清洗和再生之后色谱柱性能仍然很差，请致电当地的沃特世办事处获得更多支持。
2、正相色谱柱
要再生色谱柱，请泵送20-30倍柱体积的二氯甲烷和异丙醇通过色谱柱。也可以基于疑似污染物选用其他清洗溶剂，例如四氢呋喃(THF)。
保护柱需要根据样品污染情况定期更换。当系统背压稳步上升至设定压力限值时，通常表明需要更换保护柱。突然出现分叉峰也表明需要更换保护柱。
B.存放
将色谱柱完全密封，防止柱床因溶剂蒸发而变干。
1．反相色谱柱
如果色谱柱需要在室温下存放超过四天，应使用100%乙腈在室温下保存色谱柱(氰基的色谱柱除外)。对于高温应用，请在使用后立即使用100%乙腈保存色谱柱，以便尽可能延长色谱柱使用寿命。
切勿使用缓冲盐洗脱液保存色谱柱。如果流动相中含有缓冲盐，存放前先用10倍柱体积(常规色谱柱体积请参阅表2)的HPLC级水/有机溶剂冲洗色谱柱，然后用100%乙腈替换柱内的水。如果不执行这个中间步骤，在引入100%乙腈时，色谱柱内可能会出现缓冲盐沉淀。
注：上述储存建议的例外是用于反相方法的氰基色谱柱，这些色谱柱不应储存在100%中等极性溶剂中(乙腈、甲醇、异丙醇)。将CN-RP色谱柱储存在0.1M乙酸铵/乙腈中 50/50。
2.正相色谱柱
为了能在启动时快速平衡色谱柱，请使用常用流动相保存正相色谱柱。完全密封色谱柱避免柱床蒸发和干燥。
